Generar una vacuna intranasal recombinante que proteja a los cerdos de la infección por la bacteria L. intracellularis. la vacuna intranasal estará basada en antígenos particulados que exponen epitopos seleccionados mediante análisis bioinformático y mapeo serológico del genoma de la bacteria L. intracellularis combinados con la utilización de un adyuvante molecular, asociados a un vehículo mucoadherente apropiado para potenciar la inmunidad mucosal. Inducir con esta formulación vacunal una respuesta inmune humoral (mucosal y sistémica), celular potente, y específica en animales inmunizados, incrementada por el carácter particulado de los antígenos y por el empleo de la ruta mucosal con el fin de controlar la infección en su estado agudo, crónico, o subclínico. Generar una estrategia de producción simplificada, eficiente y conjunta de las inmunógenos en un producto con buen nivel costo/factibilidad para uso en medicina veterinaria porcina.

1.- Identificar a partir de un análisis de genómica computacional de L. intracellularis secuencias o genes que codifiquen proteínas o péptidos relevantes, determinantes de patogenicidad y epitopos para células B y T en la bacteria. Sintetizar y expresar en E. coli los genes y fragmentos de genes seleccionados, e identificar aquellos mejor reconocidos durante un mapeo serológico utilizando sueros específicos de cerdos infectados por L. intracellularis. Generar construcciones quiméricas insertando estos fragmentos en la secuencia de la proteína base VP1 del RHDV, la cual es capaz de ensamblarse para formar partículas ordenadas de alto peso molecular y exponer dominios antigénicos foráneos. Diseñar además un sistema doble de expresión de genes foráneos para la expresión de los antígenos particulados y el interferón beta porcino como adyuvante molecular. 2.- Expresar de forma soluble e intracelular en P. pastoris variantes particuladas autoensambladas de la proteína VP1 que exponen múltiples dominios antigénicos de la bacteria L. intracellularis. Expresar al unísono un adyuvante molecular (interferón-beta porcino), caracterizar ambas moléculas, purificarlas y formular los prototipos de una vacuna intranasal que será administrada a ratones y cerdos con el fin de demostrar en ensayos de competencia la habilidad de los sueros de cerdos enfermos y vacunados de reconocer los antígenos particulados. Demostrar además la inducción en cerdos de una respuesta inmune mucosal y celular potente contra L. intracellularis.