Desarrollo y Evaluación de un Sistema para el Monitoreo a Gran Escala de las Enfermedades de la Vaca Lechera (Brucelosis, Leucosis, IBR y DBV), Basado en la Inmunodetección por Elisa de Anticuerpos Específicos Presentes en Muestras de Leche Recolectadas d

Objetivo general

Establecer las bases tecnológicas de un sistema de monitoreo de Brucelosis, Leucosis, IBR y DBV en vacas lecheras, basado en análisis ELISA de muestras de leche de tanques prediales.

Objetivos específicos

Comparar sensibilidad y especificidad analíticas de kits comerciales, desarrollados para detectar anticuerpos contra Brucella abortus, virus de la leucosis bovina enzoótica, virus causante de IBR o contra el virus diarrea bovina viral en muestras de lech;; Establecer los límites del sistema de detección de anticuerpos en muestras de tanques prediales en función de títulos de anticuerpos y número de animales por tanque, a través de simulación experimental.; Correlacionar el sistema de detección de anticuerpos en leche de tanque predial, mediante asociación de los resultados ELISA con el estado de salud del rebano, establecido a través de pruebas respectivas acreditadas por el SAG.; Monitorear la presencia de Brucelosis, Leucosis, IBR y DBV en muestras representativas de los tanques prediales de la IX región y de tanques prediales en control lechero en INIACRI Carillanca, en función de las capacidades analíticas del sistema y asociar eventuales cambios de reacción a aparición de nuevos contagios o movimientos de animales.; Transferir los resultados de la presente investigación a los productores e industrias del rubro, de manera que puedan conocer y evaluar el potencial de esta nueva tecnologí

Resultados

De acuerdo a datos de ODEPA Chile cuenta con alrededor de 650.000 vacas lecheras, delas cuales 80.000 se encuentran en la VIII Región, 45.000 en la IX y 350.000 en la X, estas tresRegiones concentrando más del 73% de las vacas lecheras del país. La producción de lechealcanzó en 2004 a 1.676.000.000 de litros recibidos en 30 plantas lecheras, donde 6 empresasconcentraron el 90% de la recepción.En general, la presencia de enfermedades tiene un directo impacto en la producción de losrebanos por cuanto disminuyen la fertilidad y producción, producen pérdidas por aborto, alarganel lapso interparto y fundamentalmente constituyen barreras sanitarias para la exportación.Aunque Chile posee una condición sanitaria excepcional entre los países Latinoamericanos, aúnpersisten una serie de enfermedades zoonóticas y no zoonóticas que constituyen barreras paraarancelariaspara la exportación.Los métodos actualmente empleados en nuestro país para el diagnóstico de lasenfermedades están basados en la detección, en muestras de suero o leche, de antígenosespecíficos de los patógenos o en la detección de anticuerpos dirigidos contra el patógeno. Estosmétodos corresponden básicamente a seroaglutinación, fijación de complemento, ring test enleche e inmunodifusión en gel de agarosa. Si bien estos métodos poseen sensibilidad yespecificidad adecuados para el diagnóstico de ciertas enfermedades, sus características impidenaplicarlos en forma masiva, como puede ser para la vigilancia sistemática de un númerodeterminado de rebanos. En este contexto, el proyecto planteó introducir un sistema de vigilanciade amplia cobertura, aplicable a las enfermedades de mayor importancia en nuestra Región comoson la Brucelosis, Leucosis, IBR y DVB. El sistema está basado en el uso de la técnica ELISA, lacual permite detectar semicuantitativamente la presencia de inmunoglobulinas específicas a lospatógenos causantes de estas enfermedades, directamente en muestras de sangre o leche, sea estaúltima de animales individuales o de estanque predial. Esto es de gran relevancia ya que permitemonitorear, a muy bajo costo, la situación del rebano en el tiempo facilitando la adopción demedidas de control cuando se detecta el brote de alguna enfermedad. Las ventajas directas decontar con un sistema basado en esta tecnología son los menores costos de análisis, la posibilidadde contar con un plan sistematizado de vigilancia de gran cobertura, posibilidad de automatizarlos análisis y la generación de información que permita priorizar acciones tendientes al control deestas enfermedades.Los países Europeos han sido exitosos en mejorar la salud de sus rebanos y su producción.Un factor determinante de este éxito ha sido precisamente la adopción de tecnologíasautomatizadas para el diagnóstico de enfermedades como el sistema ELISA que junto a unaadecuada integración de la información en sistemas de bases de datos centralizadas les hapermitido controlar y erradicar las principales enfermedades de sus rebanos. En forma adicional,estos países han ido incorporando en sus sistemas de vigilancia de enfermedades nuevasherramientas de diagnóstico, tales como la reacción de la polimerasa en cadena o PCR, la cualpermite un diagnóstico directo y complementario. Esta prueba posee la capacidad de discriminaranticuerpos maternales pasivos de una infección activa y proporciona así evidencia de lainfección en la etapa pre-seroconversión, situación en que cualquier prueba serológica(incluyendo ELISA) no se puede emplear.De esta forma, el proyecto pretendió establecer las bases metodológicas para implementarun sistema de vigilancia epidemiológica de las principales enfermedades del bovino. Este sistemase complementó con la implementación de las herramientas de diagnóstico molecular de algunasde estas enfermedades, de tal forma de entregar una respuesta integral al diagnóstico de lasmismas. La base de este sistema,

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